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如何根據(jù)實驗物種及待檢樣品性質(zhì)來選擇科研ELISA試劑盒

更新時間:2018-11-26      瀏覽次數(shù):2104
如果實驗君的實驗樣品為人、小鼠或大鼠樣品,那么要選擇一個合適的http://www.2cff.com/相對容易,但如果您的實驗樣品來源于其他物種如雞、牛、猴等,則市面上能提供的試劑盒種類卻很少。且不可輕信能提供近萬種試劑盒,覆蓋多物種的供應商。但如果又非要檢測這些物種的指標時,好要對待檢物(如有種屬差異性)進行同源性分析以及試劑盒的種屬交叉反應數(shù)據(jù)。對于樣品類型而言,一般的商業(yè)化試劑盒都經(jīng)過血清、血漿和細胞培養(yǎng)上清液的驗證。在選擇試劑盒時,好要詳細閱讀說明書,比如血漿樣本抗凝劑的使用是否與試劑盒兼容。另外,在某些情形下樣品中會存在干擾因素比如溶血血漿、高脂肪含量的樣品、人抗鼠抗體(HAMA)、細胞培養(yǎng)上清中含胎牛血清等。因此需根據(jù)樣品來選擇試劑盒,必要時還要根據(jù)樣本來適當優(yōu)化。或在樣品收集前,好先閱讀一些可靠供應商試劑盒的說明書或直接咨詢。如果您的樣品為組織或細胞裂解物,則需要更謹慎的選擇試劑盒。市面上大多數(shù)的商業(yè)化試劑盒沒有經(jīng)過多種來源組織樣本的驗證。這需要實驗君能理解不是所有試劑盒所用的抗體對,都能特異的從一堆裂解物蛋白中特異檢出您的目的蛋白,還要考慮組織樣品的基質(zhì)效應(Matrix Effect)等。但如果實驗君要了解組織樣品的制備問題,我們另起一文來總結(jié)。
根據(jù)樣品中檢測物水平來選擇科研ELISA試劑盒
如果實驗君對于樣品中待檢物的水平?jīng)]有任何可參考的數(shù)據(jù),好選擇寬動力學檢測范圍的試劑盒。如果樣品中待檢物的含量很低,建議選擇高靈敏度的試劑盒。為了降低基質(zhì)效應,有必要用稀釋液至少做2倍稀釋。如果樣品中待檢物含量遠超過試劑盒的檢測范圍(標曲范圍), 也需做適當?shù)谋稊?shù)稀釋。在后計算結(jié)果時,需乘以相應的稀釋倍數(shù)。
根據(jù)樣本可獲得性來選擇科研ELISA試劑盒
通常而言,商業(yè)化試劑盒的樣品用量都在50ul或100ul, 但也有一些供應商的試劑盒對樣品的用量要求可少至10ul。如果您的樣品很珍貴或較難獲取,則需要認真考慮試劑盒對樣品用量的要求。如果樣品量少,且要做多因子檢測時更需謹慎。 
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